本研究旨在评估苹果醋 (ACV) 对暴露于慢性束缚应激的雄性和雌性 Wistar 大鼠氧化应激生物标志物的影响。严重和持续的压力会增加代谢和生理过程中活性氧 (ROS) 的产生;造成细胞损伤。将三十 (30) 只体重约 150 - 200 g 的雌雄成年 Wistar 大鼠分成 3 组,每组由雄性和雌性亚组组成,并给予以下治疗,每天一次,持续 21 天: 正常对照组口服 0.5 ml 蒸馏水, 束缚压力 (RS) 组每天暴露于慢性束缚压力 6 小时,而苹果醋 (ACV) 治疗组除了每天 6 小时的慢性束缚压力外,还口服 4 ml/kg 苹果醋。实验期后处死大鼠并通过心脏穿刺收集血液用于评估氧化应激生物标志物。ACV (4 ml/kg) 处理可降低脂质过氧化 (MDA) 和血清过氧化氢酶 (CAT) 活性,同时上调内源性超氧化物歧化酶 (SOD) 活性。这项研究的结果表明,雌性 Wistar 大鼠比雄性更容易受到 ACV 的抗氧化作用的影响。
关键字
苹果醋,超氧化物歧化酶,丙二醛,过氧化氢酶
一、简介
氧化应激定义为生物系统中活性氧 (ROS) 或氧自由基稳定水平的量度,是自由基(即活性氧 (ROS))过度产生的结果,它超过了人体的抗氧化防御机制 [ 1 ]。严重和持续的压力会增加代谢和生理过程中活性氧 (ROS) 的产生;造成细胞损伤[ 2 ]。物理约束是一种众所周知的压力模型,它会增加氧化过程,导致活性氧的产生,这可能会传播对富含脂质的膜的初始攻击,从而导致脂质过氧化 [3 ]] 。应激激素引起的活性氧过多会导致细胞结构的脂质过氧化作用增加,这在退行性疾病的发病机制中起着重要作用,例如动脉粥样硬化、DNA 氧化损伤和致癌作用。内源性抗氧化防御系统以及来自饮食的天然外源性抗氧化剂将活性氧保持在生理学上的最佳水平 [ 4 ]。内源性抗氧化系统包括一系列抗氧化酶;细胞和线粒体超氧化物歧化酶(铜/锌 (CuZnSOD) 和 Mn2+ 依赖性超氧化物歧化酶 (MnSOD)、过氧化氢酶 (CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶 (GPx) 和谷胱甘肽还原酶 (GLR),以及非酶抗氧化剂,例如谷胱甘肽 (GSH) .
苹果醋 (ACV) 是苹果发酵的液体产品。它呈棕黄色,已经使用了数百年。公元前400年,现代医学之父希波克拉底开了这种药方;由蜂蜜和苹果醋制成的 oxymel 用于治疗持续性咳嗽和其他疾病 [ 5 ]。它已被广泛用于糖尿病[ 6 ]、肥胖[ 7 ]、高血压[ 8 ]和高脂血症[ 9 ]等多种疾病的替代医学中的各种剂型。苹果醋的有益作用归因于其醋酸含量、苹果果胶和其他植物化学物质,如多酚化合物和类黄酮 [ 10 ][11 ]。雌性激素等雌激素化合物被认为可以提供抗氧化保护,而且女性被认为更能抵抗氧化应激引起的组织损伤 [ 12 ]。本研究的目的是评估苹果醋 (ACV) 处理对慢性束缚应激雄性和雌性 Wistar 大鼠的一些氧化应激生物标志物的影响。
2。材料和方法
2.1. 化学品
生的、有机的和未过滤的 Braggs 苹果醋(5% 醋酸)购自 Konga 在线商店(优惠券编号 #G049343406)、三氯乙酸 (TCA)、硫代巴比妥酸 (TBA)、盐酸 (HCl)、磷酸盐缓冲溶液、碳酸盐缓冲溶液、肾上腺素、七氧铬酸钾 (VI)、过氧化氢 (H 2 O 2 )。
2.2. 实验动物
本研究使用了 30 只体重在 150 克到 200 克之间的成年 Wistar 大鼠。它们是在实验室条件下购买、饲养和喂养的,可以自由进食和饮水,并且在实验开始前让它们适应实验室条件 2 周。
2.3. 实验设计
将三十 (30) 只 Wistar 大鼠称重并随机分为三组,每组十只,即:正常对照组、束缚应激组和苹果醋治疗组,如下所示:
2.4. 约束应力的诱导
使用[ 13 ]的方法诱导束缚应力。使用由有机玻璃制成的小型约束笼。每只大鼠都被单独关在一个多隔间的笼子里,每天 6 小时紧紧地关在笼子里,持续 21 天,以诱导束缚应激,但对照组在笼子里不受干扰,但在束缚期间没有评估食物或水.
2.5. 采集血样
动物在第22 天在氯仿麻醉下处死。通过心脏穿刺从所有组的每只处死动物中抽取 5 毫升血液。样品以 3000 g rpm 离心 30 分钟,获得血清用于评估氧化应激生物标志物。
2.6. 脂质过氧化生物标志物分析
如[ 15 ]所述,通过[ 14 ]的改进方法测量脂质过氧化。
2.7. 超氧化物歧化酶活性的测定
超氧化物歧化酶 (SOD) 活性由 [ 16 ]描述的方法测定。
2.8. 过氧化氢酶活性的测定
过氧化氢酶活性使用[ 17 ]中描述的方法测定。
3. 结果
表1为正常对照组、束缚应激组和ACV治疗组的血清MDA水平(nMol/mg蛋白质);547.28 ± 3.33、710.32 ± 26.45 和 655.52 ± 15.49 分别没有统计学意义 (p > 0.05)。与正常对照组和束缚应激组相比,ACV 治疗组的血清 SOD 显着增加(p < 0.05)。表1还显示了血清CAT的结果。与正常和慢性应激组相比,用 ACV 治疗的组在统计学上显着增加(p < 0.05)。
表2显示了血清MDA、SOD和CAT的结果。治疗组MDA结果无统计学差异。然而,与正常和慢性应激组相比,ACV 治疗组在统计学上有显着增加。与正常对照组相比,束缚应激组的血清 CAT 水平显着 (p < 0.05) 增加。与约束应力组相比,ACV 治疗组在统计学上有所降低。
4。讨论
氧化应激反映了活性氧 (ROS) 的全身表现与生物系统容易解毒活性中间体或修复由此产生的损伤的能力之间的不平衡。氧化应激与无数疾病的发展有关 [ 3 ]。在压力期间,活性氧 (ROS) 的产生增加会导致脂质过氧化反应增加 [ 1 ] [ 18] 。氧化应激生物标志物血清水平升高;在束缚应激大鼠中观察到的丙二醛、超氧化物歧化酶和过氧化氢酶活性表明慢性应激诱导引起的氧化应激增强。下丘脑-垂体肾上腺轴的激活通过不平衡的氧化还原加速氧化应激,包括线粒体活性氧的过度产生 [ 19 ] [ 20 ] [ 21 ]。这与观察到显着增加的[ 3 ] 和 [ 21 ]的工作一致
动物分组 |
血清丙二醛 nMol/mg 蛋白质 |
血清超氧化物歧化酶 单位/毫升 |
血清猫 U/毫克蛋白质 |
正常对照(1 ml/kg 蒸馏水) | 547.28 ± 3.33 | 16.98 ± 0.5 | 3.79 ± 0.32 |
约束压力(每天 6 小时) | 710.32 ± 26.45 | 18.86 ± 0.21 | 4.22 ± 0.19 |
约束压力 + ACV 处理(4 毫升/千克) | 655.52 ± 15.49 | 26.52 ± 0.39一、二 | 5.34 ± 0.29一、二 |
表 1。苹果醋 (ACV) 对约束应激雄性 Wistar 大鼠血清丙二醛 (MDA)、超氧化物歧化酶 (SOD) 和过氧化氢酶 (CAT) 水平的影响。
动物分组 |
血清丙二醛 nMol/mg 蛋白质 |
血清超氧化物歧化酶 单位/毫升 |
血清猫 U/毫克蛋白质 |
正常对照(1 ml/kg 蒸馏水) | 574.52 ± 4.05 | 14.74 ± 0.22 | 3.88 ± 0.29 |
约束压力(每天 6 小时) | 740.68 ± 14.8 | 17.62 ± 0.66 | 6.3 ± 0.14一个 |
约束压力 + ACV 处理(4 毫升/千克) | 429.92 ± 8.15 | 24.80 ± 1.11一、二 | 3.67 ± 0.17乙 |
表 2。苹果醋 (ACV) 对束缚应激雌性 Wistar 大鼠血清丙二醛 (MDA)、超氧化物歧化酶 (SOD) 和过氧化氢酶 (CAT) 水平的影响。
与正常对照大鼠相比,约束应激大鼠的丙二醛水平。[ 22 ] 报道了氧化应激生物标志物的持续升高;反复约束大鼠的超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶和过氧化氢酶水平。束缚应激大鼠氧化应激生物标志物水平升高与 [ 23 ] 观察到丙二醛水平升高但其他抗氧化酶水平减弱的发现不一致;应激大鼠的超氧化物歧化酶 (SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶 (GPx) 和过氧化氢酶 (CAT) 活性。
该研究未显示氧化应激生物标志物水平性别差异的任何显着一致性。尽管雌激素化合物被认为可以提供抗氧化保护,但受到约束压力的雌性大鼠表现出比雄性大鼠更高水平的这些应激参数,除了超氧化物歧化酶外,与雌性大鼠相比,受到约束压力的雄性大鼠的超氧化物歧化酶略高。这可能意味着响应约束程序而分泌的应激激素产生的活性氧超越了雌激素化合物提供的抗氧化保护。女性比男性有更高的应激反应。这一观察结果与[ 24 ][ 25] 谁也观察到雌性大鼠的氧化应激水平高于雄性大鼠。雌激素发挥抗氧化作用,其水平与整个月经周期的血浆抗氧化能力和抗氧化酶表达呈正相关,与氧化损伤的产物脂质过氧化物呈负相关。雌激素替代疗法 (ERT) 可恢复血浆总抗氧化能力并减少脂质过氧化物 雌激素的抗氧化作用可能与直接清除自由基活性或抗氧化酶的上调有关 [12 ]。
苹果醋处理降低血清丙二醛活性;这可能是由于苹果醋可能具有适应原性作用,可以改善动物因慢性应激而可能发生的过度脂质过氧化。苹果醋 (ACV) 中的多酚可能通过从苯酚的羟基中提供氢来中断氧化自由基链,从而形成稳定的自由基,不会引发或传播脂质的进一步氧化 [4 ]。类黄酮,尤其是苹果醋中存在的儿茶素,已被证明可以减少低密度脂蛋白 (LDL) 的氧化 [ 26 ]。这与 [ 4] 谁观察到用苹果醋处理过的卵巢切除小鼠的晶状体中脂质过氧化反应减少。雌性大鼠血清丙二醛活性水平较低所证明的脂质过氧化减少可能是由于女性性激素的作用,除了 ACV 的抗氧化作用外,雌性激素还具有抗氧化能力,从而导致脂质过氧化显着降低女性多于男性。观察到女性对这种氧化应激明显不那么敏感,这是对女性可能提供保护的第一个迹象,这可能至少部分是由于循环激素,如雌激素。24 ]。苹果醋通过调节高胆固醇喂养小鼠的 GSH-Px 来减少晶状体氧化损伤 [ 4 ]。这是由于其丰富的酚含量以及类黄酮和类胡萝卜素。酚类化合物是植物和植物产品中有助于其抗氧化活性的次级代谢产物抗氧化强度由酚类和非酚类化合物测量,因为它们通过分解过氧化物和未配对的氧分子,以及吸附和中和自由基来逆转自由基活性使它们对身体无害 [ 11] 。在雄性和雌性 ACV 处理的大鼠中观察到的血清超氧化物歧化酶活性水平升高可能是由于 ACV 的抗氧化作用,这可能增强了大鼠的抗氧化能力,或者可能上调了内源性超氧化物歧化酶的释放以响应增加的氧化应激。据报道,ACV 富含铜、锌、钾等矿物质。这可能有助于增强超氧化物歧化酶的合成,以应对氧化应激的增加。此外,ACV 中的酚酸和维生素可以清除体内的超氧阴离子和自由基,从而产生强大的抗氧化活性 [ 26]] 。ACV 处理组血清过氧化氢酶活性的轻度下降可能部分是由于 ACV 的抗氧化活性通过其高浓度的类黄酮,蒽醌和三萜类化合物抑制活性氧的过度产生,正如初步植物化学筛选所揭示的那样以及槲皮素、儿茶素、根皮苷和绿原酸,所有这些都是强抗氧化剂,可以促进适应原活性 [ 4 ]。
5.结论
发现苹果醋 (ACV) 可显着降低雄性和雌性大鼠的脂质过氧化和氧化应激,每天暴露 6 小时,持续 21 天。从这项研究来看,女性似乎对抗氧化治疗更敏感。
利益冲突
作者宣称没有利益冲突。
参考
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